Skip to main content
فهرست مقالات

بررسی توزیع‌پذیری آنزیم آلفا آمیلاز در سیستم دوفازی آبی حاوی پلی‌اتیلن گلیکول و تری سدیم سیترات مقاله

نویسنده:

چکیده:

مقدمه: یکی از راهکارهای جداسازی محصولات بیوتکنولوژی، استفاده از سیستم‌های دوفازی آبی به جای سیستم‌های رایج استخراج با حلال است. سیستم‌های دوفازی آبی روشی کاربردی برای جداسازی و تخلیص مخلوط بیومولکول‌ها بشمار می‌روند. از سیستم‌های دوفازی آبی می‌توان در تخلیص پروتئین از مجموعه بیومولکول‌های موجود در سوسپانسیون تخمیری استفاده کرد. هدف از تحقیق حاضر بررسی توزیع پذیری آنزیم آلفاآمیلاز در سیستم دوفازی آبی پلیمر- نمک است. مواد و روش‌ها: در این پژوهش سیستم دوفازی آبی شامل پلی اتیلن گلیکول با وزن مولکولیg.mol-11000 و نمک تری سدیم سیترات که نمکی زیست سازگار است، برای توزیع آنزیم آلفا آمیلاز  در نظر گرفته شد. در ابتدا جهت ارزیابی محدوده دوفازی از روش تیتراسیون نقطه ابری برای رسم منحنی بینودال استفاده شد. همچنین اثر پارامترهای عملیاتی از جمله غلظت پلیمر، نمک آلی و غلظت آنزیم به روش باکس-بنکن بر روی توزیع‌پذیری آنزیم ارزیابی گردید. نتایج بدست آمده برای ضریب توزیع‌پذیری حاصل از آزمایش‌ها، مورد بررسی آماری قرار گرفته و نتایج به صورت یک مدل درجه دوم ارائه گردید. یافته‌ ها: نتایج حاصل از رسم منحنی بینودال محدوده دوفازی را برای سیستم دوفازی-آبی بر پایه پلیمر-نمک آلی نشان می‌دهد. یافته‌های پژوهش حاضر بر روی توزیع‌پذیری نشان داد که غلظت اجزای تشکیل دهنده‌ سیستم دوفازی- آبی اثر معنی‌داری بر توزیع آنزیم آلفا آمیلاز دارند. همچنین نتایج نشان داد که بیشترین ضریب توزیع آلفا آمیلاز در سیستم متشکل از پلی اتیلن گلیکول و نمک تری سدیم سیترات، مقدار 681/2 را به خود اختصاص می‌دهد. در شرایط بهینه توزیع‌پذیری آنزیم مورد بررسی در سیستم دوفازی-آبی 102/3 تخمین زده شده است. نتیجه‌ گیری: نتایج نشان می‌دهد که غلظت پلیمر، نمک آلی تری‌سدیم سیترات و آنزیم آلفاآمیلاز بر روی توزیع‌پذیری بسیار اثرگذار هستند. بنابراین در شرایط بهینه سیستم دوفازی-آبی پلیمر-نمک آلی سیستم مناسبی برای تخلیص آنزیم است.

<strong>Introduction: </strong>One of the scenario for separation of biotechnology products is the application of aqueous two-phase systems (ATPS) rather than traditional extraction by using solvent. The ATPSs are applicable method for separation and purification of biomolecules mixture. The ATPS can be applied for protein purification of biomolecules from suspension broth. The goal of the present research is the study of partitioning of -amylase in polymer-salt aqueous two-phase system composed of polyethylene glycol with molecular weight of 1000 and tri-sodium citrate salt as a biocompatible salt. <br /><strong>Materials and Methods:</strong> The aim of this research is to study partitioning of α-amylase enzyme in an aqueous two phase system. The system consists of polyethylene glycol (PEG) with molecular weight of 1000 and tri-sodium citrate that is a biocompatible salt. <br /><strong>Results:</strong> The results for partitioning of enzyme in ATPS has been modeled and statistically analyzed; and indicated that the partition coefficient of -amylase in the system has the maximum amount of 2.681. <br /><strong>Conclusion:</strong> In this research it has been proved that ATPS components concentration has an effect on the enzyme partition coefficient. Using experimental results, -amylase has a great tendency to be placed in the PEG rich phase.

کلیدواژه ها:

آلفا آمیلاز ، پلی اتیلن گلیکول ، تری سدیم سیترات ، توزیع پذیری ، سیستم دوفازی آبی


برای مشاهده محتوای مقاله لازم است ورود پایگاه شوید. در صورتی که عضو نیستید از قسمت عضویت اقدام فرمایید.

لمشاهدة محتوی المقال یلزم الدخول إلی دخول الموقع.
إن كنت لا تقدر علی شراء الاشتراك عبرPayPal أو بطاقة VISA، الرجاء ارسال رقم هاتفك المحمول إلی مدير الموقع عبر credit@noormags.ir.

You should become a Sign in to be able to see articles.
If you fail to purchase subscription via PayPal or VISA Card, please send your mobile number to the Website Administrator via credit@noormags.ir.