Skip to main content
فهرست مقالات

بررسی تاثیر الحاق مشتق فعال گلوتارآلدئید- نانوکیتوزان به آنزیم ضد سرطان آسپاراژیناز بر پایداری و ویژگی‌های فیزیکوشیمیایی آنزیم

نویسنده:

نویسنده مسئول:

علمی-پژوهشی (وزارت علوم) (13 صفحه - از 2272 تا 2284)

چکیده:

مقدمه: آنزیم آسپاراژیناز در درمان تومور‌های وابسته به آسپاراژین به‌ویژه لنفو سارکوم و لوکمی لنفوبلاستیک حاد مورد استفاده قرار می‌گیرد. ناپایداری آنزیم سبب افزایش دفعات تزریق می‌گردد که با واکنش‌های ایمنی بالا همراه می‌باشد. هدف از مطالعه حاضر بررسی تاثیر الحاق مشتق گلوتار آلدئیدی نانو کیتوزان به آسپاراژیناز بر تغییر ویژگی‌های فیزیکوشیمیایی آنزیم می‌باشد. روش بررسی: در این تحقیق تجربی، نانو کیتوزان با استفاده از روش احیا با استیک اسید سنتز و با استفاده از میکروسکوب الکترونی و تجزیه‌گر اندازه ذرات مورد ارزیابی قرار گرفت. تولید مشتق فعال گلوتار آلدئید– نانوکیتوزان با استفاده از استیک اسید 3% صورت گرفت. الحاق مشتق گلوتار آلدئید-نانوکیتوزان به آسپاراژیناز با نسبت‌های مولی 1:2، 1:5، 1:10 و 1:20 در حضور سدیم سیانو بوروهیدرات انجام و بهترین نسبت از نظر باقیمانده فعالیت، به‌منظور ارزیابی های فیزیکو شیمیایی مورد استفاده قرار گرفت. فعالیت آنزیم در دما و pH مختلف، نیمه عمر، پایداری در طول انجماد و مقاومت در برابر پروتئولیز در شرایط آزمایشگاه با استفاده از نرم افزار آماریSPSS نسخه 18 و تست آماری آنالیز واریانس با اندازه‌های تکراری مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج: الحاق مشتق گلوتارآلدئیدی نانوکیتوزان به آنزیم سبب حفظ 70 درصد فعالیت آنزیم گردید. فعالیت آنزیم کانژوگه پس از انجماد و مجاورت با تریپسین بیشتر از آنزیم اصلی بود. دما و pH بهینه آنزیم پس از الحاق با نانو کیتوزان تغییری نداشت اما فعالیت آن در طیف وسیعی از دما و pH حفظ شد. نتیجه‌گیری: الحاق آنزیم آسپاراژیناز به‌ مشتق گلوتارآلدئید نانوکیتوزان سبب بهبود ماندگاری آنزیم گردید که می‌تواند در تولید اشکال بهینه دارو به‌منظور کاربرد های بالینی نقش داشته باشد.

Introduction: The bacterial Asparaginase is used in the treatment of asparagine-dependent tumors, particularly lymphatic sarcoma and acute lymphoblastic leukemia. However, the instability of the enzyme increases the number of injections that are accompanied by high immune responses. The aim of this study was to investigate the conjugation of L-asparaginase with nanochitosan glutaraldehyde (NCG) derivative and its effect on the physichochemical properties of conjugated enzyme. Methods: In this experimental study, nanochitosan was synthesized using reduction method with acetic acid and its physicochemical properties were evaluated using transmission electron microscopy and particle size analyzer. Activated NCG derivative was produced using 3% acetic acid. The conjugation of NCG derivative to L-asparaginase was performed with different molar ratios of enzyme/nanochitosan (1:2, 1:5, 1:10 and 1:20) in the presence of sodium cyano borohydrate; and the ratio with the highest residual activity was used for physicochemical evaluation. The activity of enzyme at different temperatures and pH, its half-life and stability after freezing and resistance to proteolysis were analyzed through repeated measure analysis of variance using SPSS 18 software. Results: The results of this study showed that the conjugation of L-asparaginase with NCG derivative resulted in maintaining the 70% enzyme activity. The activity of conjugated enzyme was higher than native enzyme after freezing and trypsin treatment. The optimum pH and temperature of conjugated enzyme did not change, while it had higher activity in wide range of pH and temperature compared with native enzyme. Conclusion: Conjugation of L-asparaginase with NCG derivative improved physicochemical and stability of enzyme and this method can be used for production of improved L-asparaginase for clinical application.

کلیدواژه ها:

خواص فیزیکوشیمیایی ، آسپاراژیناز ، گلوتارآلدئید ، نانوکیتوزان ، کانژوگاسیون

L-asparaginase ، nanochitosan ، Conjugation ، Glutaraldehyde ، Physicochemical Properties


برای مشاهده محتوای مقاله لازم است ورود پایگاه شوید. در صورتی که عضو نیستید از قسمت عضویت اقدام فرمایید.